在開始測定前，必須先用蒸餾水或用標準試樣校對讀數。如用標準試樣則對折射棱鏡的拋光面加1-2滴溴代萘，再貼上標準試樣的拋光面，當讀數視場指示于標準試樣上之值時，觀察望遠鏡內明暗分界線是否在十字線中間，若有偏差則用螺絲刀微量旋轉小孔內的螺釘，帶動物鏡偏擺，使分界線相位移至十字線中心。通過反復地觀察與校正。使示值的起始誤差降至小(包括操作者的瞄準誤差)。校正完畢后，在以后的測定過程中不允許隨意再動此部位。
在日常的測量工作中一般不需校正儀器，如對所測的折射率示值有懷疑時，可按上述方法進行檢驗，是否有起始誤差，如有誤差應進行校正。
每次測定工作之前及進行示值校準時必須將進光棱鏡的毛面，折射棱鏡的拋光面及標準試樣的拋光面，用*與乙醚(1：1)的混合液和脫脂棉花輕擦干凈，以免留有其他物質，影響成相清晰度和測量準確度。
測定工作
測定透明、半透明液體：
將被測液體用干凈滴管加在折射棱鏡表面，并將進光棱鏡蓋上，用手輪鎖緊，要求液層均勻，充滿視場，無氣泡。打開遮光板，合上反射鏡，調節(jié)目鏡視度，使十字線成相清晰，此時旋轉手輪并在目鏡視場中找到明暗分界線的位置，再旋轉手輪使分界線不帶任何彩色，微調手輪，使分界線位于十字線的中心，再適當轉動聚光鏡，此時目鏡視場下方顯示的示值即為被測液體的折射率。
測定透明固體：
被測物體上需有一個平整的拋光面。把進光棱鏡打開，在折射棱鏡的拋光面加1-2滴比被測物體折射率高的透明液體(如溴代萘)，并將被測物體的拋光面擦干凈放上去，使其接觸良好，此時便可在目鏡視場中尋找分界線，瞄準和讀數的操作方法如前所述。
測定半透明固體：
用上法將被測半透明固體上拋光面粘在折射棱鏡上，打開反射鏡并調整角度利用反射光束測量，具體操作方法同上。
測量蔗糖溶液質量分數：
操作與測量液體折射率相同，此時讀數可直接從視場中示值上半部讀了，即為蔗糖溶液質量分數。
測定平均色散值：
基本操作方法與測量折射率相同，只是以兩個不同方向轉動色散調節(jié)手輪時，使視場中明暗分界線無彩色為止，此時需記下每次在色散值刻度圈上指示的刻度值Z，取其中平均值，再記下其折射率nD。根據折射率nD 值，在阿貝折射儀色散表的同一橫行中找出A和B值(若nD在表中二數值中間時用內插法示得)。再根據Z值在表中查出相應的a值，當Z>30時a值取負值。當Z<30時a取正值，按照所求出的A、B、a值代入色散值公式nF-nC=A+Ba就可求出平均色散值
若需測量在不同溫度時的折射率，將溫度計旋入溫度計座中，接上恒溫器的通水管，把恒溫器的溫度調節(jié)到所需測量溫度，接通循環(huán)水，待溫度穩(wěn)定十分鐘后，即可測量。
